MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE
Permanent URI for this community
Browse
Browsing MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE by Issue Date
Now showing 1 - 20 of 53
Results Per Page
Sort Options
Item Open Access RESULTS OF THE AUTOLOGOUS MESENCHYMAL STEM CELL TRANSPLANTATION IN PATIENTS WITH TYPE 1DIABETES MELLITUS(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Ulyanova, O.; Baigenzhin, A.; Askarov, M.; Kozina, L.; Karibekov, T.; Taubaldieva, Zh.; Serebrennikova, D.; Boltanova, A.Introduction: Type 1diabetes mellitus (T1DM) remains one of the main public healthcare problems worldwide with a tendency to steady growth. T1DM leads to kidney failure, blindness, heart attacks and strokes, which account for high rates of morbidity and mortality among patients with T1DM. A replacement of beta cells is the goal of therapy for T1DM. Recent clinical studies have shown a promising stem cell role in the treatment of T1DM. We evaluated the therapeutic effect of autologous mesenchymal stem cell transplantation (AMSCT) on carbohydrate metabolism markers in T1DM patients. Methods: We examined 7 patients (5 male, 2female, aged 20-42) with T1DM, who underwent AMSCT (cells were obtained from the patients’ iliac crest and cultivated for 3-4 weeks) by intravenous infusion. The quantity of autologous mesenchymal stem cells infused was from 95 to 97 × 106. We analyzed the daily insulin dosages, glycated hemoglobin (HbA1c), glutamic acid decarboxylase (GAD) antibody and Langerhans antibody levels in patients before, 1, 2and 3 months after the AMSCT procedure. Results: In patients with T1DM, AMSCT led to decrease in daily insulin dosage levels from 58,81± 13,71Units to 47,5± 12,7 Units (p=0,04) with trend to increase leptin levels and decrease HbA1c levels, from 7,73 + 3.5 ng/ml to 16,9 ± 8,31ng/ml (p= 0,046) and 9,59±1,73% to 8,65±0,93 % (p = 0,092) after 1month, respectively. GAD antibody and Langerhans antibody levels didn’t change significantly after AMSCT: from 10,79 + 4,52IU/ml to 12,33 ± 3,81IU/ml (p> 0,05) and 14,12+4,26 IU/mL to 18,17+9,03 IU/mL (р=0,485) after 3 months, respectively. Conclusions: The AMSCT led to decrease of the daily insulin dosage levels with increase of the leptin levels after 1month without increasing of the GAD and Langerhans antibody levels within 3 months in patients with T1DM.Item Open Access New Screening Options for Patients With Thalassemia: Lebanon Experience(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Andrusha, A.B.; Mohamad, B.S.Introduction: Morbidity and mortality in beta thalassemia are caused by anemia and iron overload. The prognosis of patients with thalassemia major depends on the patient’s adherence to treatment programs. The early identification of the patients at the preclinical stage contributes to the implementation of relevant recommendations that improve the quality of life and allow manage disease more effectively. Our aim is assess the main criteria for effectiveness of using laboratory screening methods for detecting thalassemia. Methods: The Chronic Care Center (Beirut, Lebanon) organized screening campaigns in order to identify new carriers within the general population and high risk group. By performing complete blood count, and if mean corpuscular volume (MCV) is decreased, then order hemoglobin electrophoresis with quantitative adult hemoglobin (HbA) and fetal hemoglobin, also iron studies are done (iron and ferritin). The Genetic Laboratory provided prenatal tests: testing of chorionic villous sampling (at 10-12weeks gestation) or amniotic fluid, and Pre-implantation genetic diagnosis for beta-thalassemia Results: Screening programs showed a carrier rate of around 2.3% in the general population, and 4.0- 41.0% in high risk groups. There has been a significant decrease in the number of new cases of thalassemia in patients, reflecting the efforts being made to prevent this disease. In our opinion, two disadvantages of this screening method are obvious. Firstly, some limitations are faced in reaching a complete eradication of the disease, mainly due to the fact that abortion is illegal and pitfalls and incorrect implementation of the premarital law. Secondly, the major pitfall in the law is that only persons with a MCV of >70.0 fL are asked to perform further hemoglobin electrophoresis. Conclusion: Screening strategies are very important for the prevention of a specific disease especially in high risk population by early identification of the patients and identifying carriers. Although medications for thalassemia are prescribed only for the correction of symptoms and complications, and there is no drug therapy for the disease itself, but diagnosis of thalassemia at the preclinical stage can improve the quality of life and prognosis of patients, as well as effectively manage the disease.Item Open Access DRUG RESISTANCE OF MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS CLINICAL ISOLATES FROM NEW TB CASES IN KAZAKHSTAN(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Kozhamkulov, U.; Akhmetova, A.; Rakhimova, S.; Daniyarov, A.; Molkenov, A.; Bismilda, V.; Chingissova, L.; Kairov, U.; Akilzhanova, A.Introduction: Nowadays and worldwide, TB is one of the top 10 causes of death and the leading cause from a single infectious agent. The global incidence of drug-susceptible TB, multidrug-resistant (MDR) and extensively drug-resistant (XDR) tuberculosis in the past decade led to decreased efficiency of chemotherapy. In Kazakhstan, the 2019 WHO report estimates the TB incidence in 2018 to be 68 per 100 000 population and the MDR-TB incidence to be 26/100,000 (WHO, 2019). Therefore, the goal of the study is to analyze clinical isolates from new TB Kazakhstani patients by determining drug resistance, genotyping and whole genome sequencing. Methods: 192M.tuberculosis drug resistant strains from new TB cases were analyzed. Resistance to the first-line anti-TB drugs were determined using absolute concentration method on L-J media and BACTEC MGIT-960. Spoligotyping was performed using commercially available kit “Ocimum Biosolutions Inc”. The whole genome sequencing was carried out on Roche 454 GS FLX+ platform. Results: The structure of 192drug resistant isolates showed that 98 (51.04%) were MDR, 55 (28.65%) – polyresistant, 39 (20.31%) – monoresistant. Genotyping results showed that W-Beijing family identified in 143 (74.48%) cases, T – 23 (11.98%), LAM – 11(5.73%), Haarlem - 10 (5.21%), U – in 4 (2.08%) and MANU-2– 1(0.52%) case only. W-Beijing family M.tuberculosis was a dominant genotype and composed more than 50% of two resistant groups: polyresistant - 70.9% and MDR - 87.75% clinical isolates of M.tuberculosis. Missense mutation of rpoB gene at codon 531with amino acid substitution Ser/Leu was the prevalent among mutations responsible for rifampicin resistance (87.75%). In case of isoniazid resistance, the most prevalent (96.94%) mutation was substitution at codon 315 Ser/Thr including 3 cases (3.06%) with double mutation when replacement simultaneously took place at katG gene and -15 position of promoter mabA (fabG)-inhA operon. Conclusion: MDR strains are predominant among resistant strains and mostly belong to Beijing family in Kazakhstan. W-Beijing is the most common genotype among all categories of drug resistant M.tuberculosis. As such MDR-TB should be a national priority in National TB Program for Kazakhstan. Acknowledgements: grant# АР05134737 MES RK.Item Open Access STRUCTURAL CHANGES IN THE MICROBIOME IN RATS WITH DSS-INDUCED COLITIS(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Kozhakhmetov, S.; Babenko, D.; Tuyakova, A.; Nurgaziyev, M.; Nurgozhina, A.; Muhanbetganov, N.; Chulenbayeva, L.; Sergazy, S.; Gulyayev, A.; Kushugulova, A.Microflora plays a critical role in the initiation and development of inflammatory bowel disease (IBD). There are many facts accumulated about the effect of intestinal dysbiosis on the pathogenesis of Crohn’s disease and ulcerative colitis (UC). A biological preparation based on intestinal bacteria can modulate the intestinal normoflora in IBD. We evaluated the effect of the biological drug on rat intestinal microbiome in DSS-induced colitis.Rats were divided into 4 groups: without a colitis model (n = 7); with a colitis model received (n=6); experimental group animals (with a colitis model) received a 10% DSS solution for 7 days, and biology product intragastrically at a dose of 500 mg/kg body weight once per day for 7 days (n = 7); comparison group animals (with a colitis model) received a 10% DSS solution for 7 days and as a treatment the 5-ASA (5-aminosalicylic acid) intragastrically at a dose of 100 mg / kg of animal body weight once for 7 days (n = 6). In our work, we found a decrease in bactericides after 7 days of 10% DSS. An increased in the biodiversity index in the control group is associated with an increase in the following genera: Murimonas, Victivallales, Anaerofustis and etc. Wang W. et. al. shows a decrease in the number of Lactobacillus and Bifidobacteria were significantly reduced in DSS-induced colitis. In our study, the use of biological product show to the partial restoration of certain types of intestinal bacteria such as gram-positive Clostridium XVIII, Faecalibacterium, gram-negative Microbacter, Phascolarctobacterium producing SCFAs, etc.Item Open Access SPECIFICATIONS OF NUTRITION WITH HEALTHY AND PATHOLOGICAL CONDITIONS OF PSORIASIS(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Nurgozhina, A.; Yermekbayeva, B.; Gulyayev, A.; Kozhakhmetov, S.; Sergazy, S.; Nurgaziyev, M.; Aitenov, Y.; Chulenbayeva, L.; Tuyakova, A.; Kushugulova, A.Psoriasis is a long-lasting autoimmune disease characterized by patches of abnormal skin. 183 participants in the experiment were selected for the study, half of which are with psoriasis disease. All participants in the study passed the EPIC-Norfolk Food Frequency Questionnaire, which was completed once and included a diet over the past week. The aim of the study was to identify the intakes of different nutrients in two groups by age. AfterquestionnaireFETAtoolwasusedtoanalyzeallanswers (http://www. srl.cam.ac.uk/epic/epicffq/). The output was the results for all nutrients and macro and microelements that are in the food. Significant differences in patients were in eight nutrients, namely: betacarotene, carotene, fructose, potassium, potatoes, fruits, nuts and seeds, and vegetables. All differences are in favor of healthy patients. patients with psoriasis had a diet with low income of fruits and vegetables which brought to the deficiency in some nutrients and vitamins. The used tool for converting food frequency questionnaire data into nutrient and food group values can be used widely for different study populations.Item Open Access ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НЕЙРОСЕТЕВОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ ДЛЯ РАННЕГО ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПАРКИНСОНИЧЕКОГО СИНДРОМА ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИШЕМИИ МОЗГА(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Андронова, М.А.; Статинова, Е.А.; Сайко, Д.Ю.; Андронова, И.А.; Черний, Т.В.Введение: В последние годы отмечается тенденция к омоложению хронической ишемии мозга (ХИМ), поэтому важно на основе комплексного клинико-неврологического и клинико-инструмен- тального обследований обеспечить раннюю диагностику паркинсонического синдрома у боль- ных ХИМ. Методы: в работе использованы клинические, нейропсихологические, электрофизиологические (ЭЭГ, ЭКГ и вариабельность ритма сердца), ультразвуковые (транскраниальная допплерография), статистические (построение и анализ нейросетевых моделей в пакете StatisticaNeuralNetworks 4.0) методы. Результаты: Для проведения кластеризации данных исследуемых в многомерном пространстве признаков использовали сети Кохонена. Все показатели больных ХИМ были дифференцированы на два нейрона в выходном слое, и были разделены на два кластера (Cl 1и Cl 2). Выводы: На основании кластерного анализа были разработаны «математические модели» ХИМ с доминированием паркинсонического синдрома (ПС) (Cl 1) и без ПС (Cl 2) в количественных пара- метрах (Ме(ДИ±95%)) клинических, неврологических, нейропсихологических, нейрофизиологиче- ских и гемодинамических показателей.Item Open Access ISOLATION OF NATURAL REPRESENTATIVES OF CARP LACTOFLORA TO CREATE PATHOGEN CONTROL AGENTS THAT CAN BE ALTERNATIVE TO ANTIBIOTICS(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Urazova, M.; Zakarya, K.; Sarmurzina, Z.; Bissenova, G.; Abitayeva, G.; Shevtsov, A.; Tekebayeva, Zh.; Tynybayeva, I.; Abzhalelov, A.Currently, the microbiome of commercial fish species is being actively studied. In reviews, mainly based on metagenome analysis features and formation of intestinal microflora of various fish species of North America, Asia and Europe have been presented. Results of these researches showed that lactic acid bacteria (LAB) are common microbial group of intestinal microbiota of fish (Wu et al., 2012; Ye et al., 2014; Borsodiet al., 2017; Wang et al., 2018). In our research a characteristic of 22lactic acid bacteria isolated from Common Carp (Cyprinus carpio) intestines were studied. All of them were tested for their ability to inhibit growth of Aeromonas punctate, Shewanella xiamenensis, Pseudomonas aeruginosa,Pseudomonas taiwanensis.In sum, 7 isolates with high antagonistic activity were selected. 16S rDNA gene sequencing identified them as Lactobacillus fermentum(4), Lactobacillus casei/paracasei (2) and Pediococcus pentosaceus (1). All identified isolates can grow in wide temperature range (10° C to 37° C) and in presence of bile. Earlier the species of Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus, Enterococcus,Pediococcus and Carnobacteriumgenera were isolated from carp intestines (Bucio et al., 2006; Wang et al., 2018). We isolated only strains, belonging to 3 species (Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei/paracasei and Pediococcus pentosaceus). It is low rate of species diversity. Perhaps this is due to the conditions, when we made isolationof LAB. It wasmade at the transition period from wintering to active spawning.The climate of Central and Northern Kazakhstan is severe and it is characterized by a cold winter lasting 5,5-6 months. Long wintering is a stress for an animal, and its microflora too. During the wintering period, carps do not feed, the composition of their microflora becomes poorer.The dominance of somespecies among intestinal LAB during cold period should be due to their specific characteristics, such as resistance to low temperatures and unfavorable environmental factors.Selective 7 strains could be alternatives to antibiotics for freshwater aquaculture in Kazakhstan.Item Open Access ИЗУЧЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ВЕРБЛЮЖЬЕГО МОЛОКА(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Кудайбергенова, А.Изучение пробиотических свойств микроорганизмов, на сегодняшний день получило широкое распространение, но не утратило актуальности. Препараты на основе молочнокислых бактерий используются для лечения и профилактики заболеваний, связанных с разнообразными формами нарушения состава нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта благодаря их антагонистической способности воздействия на патогенные микроорганизмы. Молочнокислые бактерии являются одним из основных классов кислотообразующих организмов в пищевой промышленности, и они играют жизненно важную роль во многих пищевых продуктах и кормить брожением. Мы выделили и провели молекулярную идентификацию из сырого верблюжьего молока. Образцы молока были получены от здоровых верблюдов, с соблюдениями правил санитарной гигиены. Вымя было трижды вымыто с дистиллированной водой перед сбором молока и высушено одноразовым полотенцем. Первые три потока молока были отброшены. Образцы молока собирались в стерильные пробирки, помещены в холодильную камеру и доставлены в лабораторию в течении 24 часов. Выделение молочнокислых бактерий проводили путем посева, предварительно подготовив разведение 10 мл молока в стерильном солевом растворе 90 мл концентрацией 8,5 гр/л. И последующем разведении в стерильном солевом растворе до 10-8 и посеве 1мл на среду Man-Rogosa (MRS) и Saburo для выделения дрожжей. Изоляты полученные после выделения были морфологически изучены, прошли окраску по Грамму и каталазный контроль. Для определения видового уровня были отобраны грамположительные, каталаза-отрицательные штаммы. После проведено генотипирование с использованием 16S рибосомальной ДНК. Результаты:, были обнаружены 13 различных штаммов относящихся к Lactobacillusparacasei, Lactobacilluskefiri, Enterococcusfaecium и 14 видов дрожжей. Дальнейшие исследования будут направлены на изучение функциональных пробиотических свойств, таких как устойчивость к повышенной кислотности, ферментам и желчи, синтез бактерицидных веществ и антагонистическая активность, протеолитическую активность, способность к адгезии и др.Item Open Access ТЕЧЕНИЕ КОРИ У ДЕТЕЙ С НЕБЛАГОПРИЯТНЫМ ПРЕМОРБИДНЫМ ФОНОМ(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Жузжасарова, А.А.; Баешева, Д.А.; Турдалина, Б.Р.; Есимханова, Г.О.; Сейдуллаева, А.Ж.; Кушугулова, А.Р.; Кожахметов, С.С.Введение: Корь является высококонтагиозным инфекционным заболеванием вирусного происхождения. С ноября 2018 г в Республике Казахстана зарегистрированна эпидемическая вспышка кори. Продолжающаяся регистрация заболеваемости корью, принимающей характер эпидемических вспышек, обусловлена недостаточным охватом детей вакцинацией (около 80%) во всем мире. С ноября 2018 г по декабрь 2019 г в РК зарегистрировано 13873 случев, из них 71,2% (n=9875) дети в возрасте от 6 месяцев до 14 лет. Особенную опасность корь представляет для де- тей с неблагоприятным преморбидным фоном, имеющих иммунодефицитное состояние. Цель. Оценить клиническую характеристику кори у детей с неблагоприятным преморбидным фоном. Методы: Анализ 147 истории болезни детей пролечивших в МГДБ № 3 с диагнозом Корь. Результаты: Возрастная характеристика: дети до года - 53%, от 1года до 6 лет – 43%, от 7 лет и стар- ше составили – 4%. Вакцинальный статус: 82,2% детей не получали вакцину ККП. Корь у пациентов протекала в среднетяжелой форме у 14,2% детей, в тяжелой форме у 72% больных, крайне тяже- лое состояние отмечалось у 13,8% больных, были госпитализированы в отделение интенсивной терапии и реанимации. Преморбидный фон больных корью: ДЦП- 42,2%, ВПС-13%, синдром Дау- на-12,8%, ВПР-6,4%, микроцефалия-6,4%, классическая медуллобластома IV желудочка головного мозга-3,2%, анапластическая эпендимома IV желудочка головного мозга-3,2%, ИДС-3,2%, БЭН-3,2%, БЛД-6,4%. Осложнение: пневмония-29%, ОРДС-16%, ДВС-6%, кардит-9,6%, отек легких-6,4%, диарея – 16%, отит –3%. У 7,5% больных развивался ОРДС на 4-7 сутки: тахипноэ, диспноэ, цианоз, участие вспомогательной мускулатуры в акте дыхания. Снижение сатурации менее 90%, респираторный алкалоз - 6,8%. Тахикардия у 5,4% больных и изменение в рентгене ОГК в виде «Матового стекла» обнаружились у 2% пациентов. У 8,2% больных развивался кардит на 7-10 сутки заболевания, диагноз выставлялся на основании малых и больших критериев, согласно протоколу № 5 от «23» июня 2016 года. В биохимических показателях крови отмечалось увеличение количества СРБ, МВ-КФК, АСТ, ЛДГ, которая встречалась у всех больных. Данные объективного исследования у пациентов характеризовались наличием тахикардии у 6,1%, ослабление 1-го тона при аускультации сердца у 4,8%, аритмии у 3,4% , увеличение размеров сердца - у 2,7%. Выводы: отсутствие вакцинации и наличие неблагоприятного преморбидного фона у заболев- ших корью, характеризовалась тяжелым течением и развитием осложнении: ОРДС на 4-7-е сутки заболевания, кардитов на 7-10-е сутки заболевания, который сопровождалось в 8,8 % случаев ле- тальности.Item Open Access УЛЬТРАСТРУКТУРА МОНОНУКЛЕАРНОЙ ФРАКЦИИ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКОЙ АУТОИММУННОЙ ПАТОЛОГИЕЙ ДО И ПОСЛЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Федотовских, Г.В.; Шаймарданова, Г.М.; Аскаров, М.Б.; Ежеленко, Т.Г.; Марат, С.Введение: Аутологичные клетки костного мозга больных с хронической аутоиммунной патологией характеризуются снижением биорегуляторной активности и мало пригодны для клеточной терапии. Важным способом повышения функциональной активности трансплантируемого клеточного материала является культивирование. В цель работы входило оценить на ультраструктурном уровне морфо-функциональное состояние клеток мононуклеарной фракции костного мозга больных с тяжелой аутоиммунной патологией до и после культивирования. Материал и методы: После клинико-лабораторного обследования 33 больных с системной склеродермией и первичным билиарным циррозом печени была проведена аспирация костного мозга из гребня подвздошной кости в количестве 400 мл. Клетки мононуклеарной фракции костного мозга культивировали в течение 72часов. Для электронномикроскопического исследования клетки фиксировали в 2,5% растворе глютаральдегида с постфиксацией в 1% растворе четырехокиси осмия, проводились по общепринятой методике и заключались в эпон. Ультратонкие срезы готовили на ультрамикротоме LeicaУльтратонкие срезы контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца по Рейнольдсу, исследовали и сохраняли в электронном микроскопе Libra (C. Zeiss). Результаты: Морфо-функциональное состояние клеток различных классов кроветворения до культивирования характеризовалось ультраструктурными признаками энергетической дисфункции митохондрий и недостаточности микровезикулярной секреторной функции. После прекультивирования отмечено появление малых лимфоцитов и бластных форм. Содержание клеток предшественников (прогениторов) было высоким СД 34+ (25.85%), СД 45+34+ (78,24%, 71,60%). Ультраструктура митохондрий отражала усиление процессов окислительного фосфорилирования, обеспечивающих высокую биосинтетическую активность данных клеток. Увеличивалось количество и улучшалось качество секреторных везикул - эндосом с экзосомами, участвующих в регуляции иммунного ответа. Помимо апоптозных тел, имеющих важное значение в межклеточной коммуникации стволовых клеток, нами были отмечены лимфоциты в состоянии преапоптоза с резкой конденсацией ядерного хроматина,что возможно, имеет отношение к передаче генетической информации. Выводы: Культивирование мононуклеарной фракции костного мозга больных с аутоиммунной патологией характеризуется появлением малых лимфоцитов и бластных форм, наличием лимфоцитов с устраненной митохондриальной недостаточностью,увеличением количества секреторных везикул и структур межклеточной коммуникации.Item Open Access Molecular Genetic Approaches in Diagnosis of Duschenne/ Becker Muscular Dystrophy(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Bayanova, M.; Uahit, R.; Tolegen, N.; Nazarova, L.; Abilkhadirova, A.; Khamzina, A.; Nauryzbaeva, A.; Jaxybayeva, A.Introduction: Duchenne/Becker muscular dystrophy (DMD/BMD) is inherited X-linked disease with a frequency of 1: 3,500 newborn males. Deletions and duplications in the DMD gene are errors of reading frameshift and premature termination of translation. Structural rearrangements of BMD does not lead to reading frame rule, DNA polymerase can “skip” deleted exons , which leads to the synthesis of truncated protein, which can fulfill its functions some extent. Methods: We studied the DNA of 104 patients with suspected DMD / BMD and heterozygous, as well as chorionic villi samples (CVS) obtained by prenatal diagnostics. Multiplex Ligation - dependent Probe Amplification(MLPA) (MRC Holland) was used to study of copy number variations of 79 exons of DMD gene. Validation MLPA results and whole exome sequencing (WES) of patients with MLPA negative results were performed at Centogene (Germany). Detection of nonsense mutations leading to the appearance in mRNA a premature stop codons of DMD gene are relevant to stratify patients for antisense-targeted therapy of Duchenne muscular dystrophy. Results: Mutations of (36) 37 % of patients were revealed in the DMD gene. Deletions were detected in (27) 75 %, duplications in (9) 25% of cases. WES of 41patients was conducted for validation and MLPA negative results. Point mutations were identified in 30 (73%), frameshift missense mutations - in 7 (23%), nonsense mutations - in 9 (30 %) cases. Validation of MLPA results (deletions) were performed in 14 patients (46 %). Conclusions: Algorithm of molecular diagnostic of DMD /BMD by MLPA is a method for the detection of large deletions and duplications 79 exons of DMD gene and WES should be to determine the missense and nonsense mutations of DMD gene. Our results formed the basis of clinical protocols of diagnostic and treatment of Duchenne/Becker muscular dystrophy in Kazakhstan.Item Open Access ИССЛЕДОВАНИЕ КЛОНА КЛЕТОК С ДЕФЕКТОМ НА ПОВЕРХНОСТИ МЕМБРАНЫ ЗАЯКОРЕННЫХ БЕЛКОВ GPI-AP ПРИ ПАРОКСИЗМАЛЬНОЙ НОЧНОЙ ГЕМОГЛОБИНУРИИ(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Орумбаева, У.Р.; Наурызбаева, Г.Введение: Пароксизмальная ночная гемоглобинурия - редко встречающееся приобретенное заболевание, вызванное нарушением эритроцитарной мембраны, в патогенезе которого имеет место частичная или полная потеря белка GPI-AP (glycosyl-phosphatidylinositolanchorprotein) на поверхности клеток. Данный белок является якорем, при потере которого, часть важных белков не могут присоединиться к мембране. Способность присоединиться теряют многие белки, что используется для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии (эритроциты CD59-, гра- нулоциты CD16-, CD24-, моноциты CD14-, FLAER (Fluorescentlylabeledaerolisin). Клетки с признаками отсутствия исследуемых белков называют ПНГ-клон. Методы: Иммунофенотипирование периферической крови проводилось методом прямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител (МАТ), с применением высокочувствительной проточной цитометрии. Обследовано 110 пациентов с подозрением на наличие ПНГ-клона. Результаты: По итогам обследованных пациентов выявлено 19 пациентов с положительным ПНГ-клоном. Из них мужчин-11, женщин-8, 2ребенка в возрасте 11и 6 лет. Среди мужчин средний возраст составил-35лет, среди женщин-30 лет. При исследовании наличия ПНГ-клона на популяции эритроцитов наблюдается разделение эритроцитов на 2и 3 тип, который косвенно отражает степень гемолиза последних. К 3-му типу относятся эритроциты с полным отсутствием заякоренных белков GPI-AP и соответственно полностью лишенные на поверхности мембраны CD59, FLAER. Среди пнг-эритроцитов были выявлены популяции с минимальным количеством клона, так называемый минорный клон. Подобные случаи протекают под маской других заболе- ваний, соответственно оставались без эффективного лечения. К сожалению, большинство слу- чаев остаются недиагностированными. При данных состояниях высока вероятность нарастания размера клона и прогрессии гемолиза, что требует соответствующей терапии, с необходимостью проведения мониторинга дважды в год. Выводы: На сегодня, опираясь на мировую практику, становится абсолютно очевидным, что в первую очередь скрининговые программы по выявлению на наличие ПНГ-клона должны проводиться именно среди этих групп пациентов с: - Апластической анемией; - Рефрактерными анемиями при МДС; - Гемоглобинурией; - Гемолитической анемией; - Цитопениями неясной этиологии; - Тромбозами атипичной локализации. Таким образом, можно сделать заключение, что метод предложенный ICCS, является эффектив- ным и высокочувствительным и является золотым стандартом, сопоставимой с международной стандартизированной методикой, и является доказательным. Исследование позволяет опреде- лить наличие ПНГ-клонов как значительного размера у пациентов с истинной пароксизмальной ночной гемоглобинурией, так и минорных - от 0,001до 1%, у пациентов с апластической анемией, также при миелодиспластическом синдроме, когда заболевание сопровождаются глубокой пан- цитопенией и гипоплазией костного мозга.Item Open Access THERAPEUTIC POTENTIAL OF MESENCHYMAL STEM CELLS IN ATHEROSCLEROSIS: PROGRESS AND FUTURE PERSPECTIVES(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Ogay, V.B.Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease of the arterial intima characterized by the formation of athermanous plaques leading to the occlusion of arteries. In these regards, atherosclerosis is at the core of cardiovascular diseases that lead to myocardial infarction, coronary heart disease, stroke and lower limb ischemia. Despite the available drug therapy that is designed to reduce cholesterol and low-density lipoprotein in the blood of patients, atherosclerosis is the most common cause of disability and premature mortality of the population around the world. Taking into consideration inflammation of endothelium as one of the main processes involved in all stages of atherosclerosis, suppressing inflammation and balancing immunity was a promising treatment strategy for atherosclerosis. Mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent stromal cells that can be derived from various tissues including bone marrow, muscle, adipose tissue, umbilical cord blood, dental pulp, placenta and gingival. MSCs have unique features of self-renewing, immune-tolerance and differentiation into a number of specialized cell types such as adipocytes, osteoblasts, chondrocytes, muscle and endothelial cells. Moreover, recent studies reveal that MSCs possess strong anti-inflammatory and immunomodulatory properties as well as participate in the lipid metabolism, reducing plasma cholesterol during the development of atherosclerosis. Thus, MSCs have attracted the attention of scientists and clinicians as a novel therapeutic tool for treatment of atherosclerosis. A number of animal studies demonstrated that transplantation of MSCs occur beneficial therapeutic effects on atherosclerosis development such as restoring endothelial function, suppressing inflammatory processes, reducing plaque formation and dyslipidemia. However, these effects of MSCs on development of atherosclerosis still remain limited. Thus, how to enhance the therapeutic potential of MSCs for effective atherosclerosis treatment is the key current issue. In this report, we summarize the current literatures on MSCs and their potential application for preventing and regressing atherosclerosis as well as discuss preconditioning strategies for improving the efficacy of MSC-based therapy.Item Open Access ЦИТОПРОТЕКТОРНЫЙ ПОТЕНЦИАЛ ЭКСТРАКТОВ КЛЮКВЫ, БРУСНИКИ, ЧЕРНИКИ(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Жуликеева, А.; Сегизбаева, Г.; Шульгау, З.; Харитонова, М.; Гуляев, А.; Кривых, E.; Сергазы, Ш.Терапевтический потенциал северных ягод связывают с высоким содержанием полифенольных субстанций. Экстракты клюквы, брусники, черники вследствие высокого содержания полифенолов, способны обладать антиоксидантными и цитопротекторными свойствами. В данном исследовании изучали цитопротекторные эффекты полифенольных экстрактов клюквы, черники, брусники на клеточных культурах invitro. Стандартизацию экстрактов проводили по общему фенольному числу – 10 мг/мл. Вероятные цитопротекторные свойства экстрактов северных ягод оценивали в МТТ-тесте на первичной культуре альвеолярных макрофагов кролика и перевиваемой клеточной культуре НЕК293 (humanembryonickidney, АТСС® CRL-1573™). Число альвеолярных макрофагов кролика в каждой лунке планшета составило 106 клеток в 1мл среды, клеток НЕК293 – 104 кле- ток. Экстракты клюквы, черники и брусники изучали в разведениях 1:10 и 1:100. В лунки вноси- ли исследуемые соединения (0,1мл): экстракты клюквы, черники и брусники в разведениях 1:10 и 1:100; доксорубицин в конечной концентрации 1мкг/мл и 10 мкг/мл; доксорубицин 10 мкг/мл + экстракты клюквы, брусники, черники в разведении 1:100; контроль – клетки без добавления ис- следуемых субстанций. Альвеолярные макрофаги крорлика инкубировали при 37°C в атмосфере CO2(5%) в течение 2часов, НЕК293 – в тчение 48 часов. Жизнеспособность клеток в контроле при- нимали за 100%. Эксперименты были выполнены в трёх повторностях. При добавлении к альве- олярным макрофагам экстрактов северных ягод в разведении 1:100 жизнеспособность клеток в сравнении с контролем не менялась, цитотоксическое действие отсутствовало, при внесении экстрактов в разведении 1:10 жизнеспособность клеток увеличивалась. Введение доксорубицина приводило к дозозависимому снижению жизнеспособности клеток. Присутствие в питательной среде экстрактов северных ягод нивелировало цитотоксическое действие доксорубицина. При инкубации клеток НЕК293 с экстрактами северных ягод в разведениях 1:100 жизнеспособность клеток сохранялась, при увеличении концентрации экстрактов жизнеспособность клеток расла. Цитотоксический доксорубицин ингибирует жизнеспособность клеток, но внесение экстрактов северных ягод в среду инкубации способствует сохранению жизнеспособности клеток. Способность полифенольных экстрактов предохранять клетки альвеолярных макрофагов и НЕК293 при различных режимах инкубации от воздействия цитотоксических эффектов наглядно выявляется в экспериментах с доксорубицином. Считаем, что эти результаты дают нам основания для предположения о наличии цитопротекторного потенциала у полифенольных экстрактов северных ягод. Входящие в состав экстрактов клюквы, брусники, черники полифенолы (флавоноиды, антоцианы и проантоцианидины), как антиоксиданты, способны защищать клетки от оксидативного повреждения, присутствующего в механизме цитотоксичности доксорубицина.Item Open Access EFFECT OF MARE’S MILK PREBIOTIC SUPPLEMENTATION ON THE GUT MICROBIOME AND THE IMMUNE SYSTEM DURING AND AFTER ANTIBIOTIC THERAPY(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Nurgaziyev, M.; Aitenov, Y.; Khassenbekova, Zh.; Akpanova, S.; Rysbekov, K.; Kozhakhmetov, S.; Nurgozhina, A.; Sergazy, Sh.; Chulenbayeva, L.; Ospanova, Zh.; Tuyakova, A.; Mukhambetganov, N.; Sattybayeva, R.; Urazova, S.; Galymgozhina, N.; Gulyaev, A.; Kushugulova, A.Antibiotic treatment can severely affect the gut microbiome with short-term and long-term consequences. Probiotic and prebiotic supplements are widely prescribed to modulate the composition and function of the human gut microbiome. The current study aims to determine the impacts of mare’s milk prebiotic on the diversity of gut bacterial communities and the local immune system when administered during and after a course of antibiotic therapy. Six children aged 4 to 5 years diagnosed with bilateral bronchopneumonia were prescribed cephalosporin (Cefuroxime) antibiotics. During the 60 days of the study, 3 children consumed mare’s milk prebiotics whereas the other 3 did not. Fecal samples were collected daily during antibiotic therapy and every 5 days after antibiotic therapy. Total DNA was isolated and taxonomic composition of the gut microbiome was analyzed by sequencing of the 16S rRNA gene (V1-V3 region). To evaluate the local immune status the MILLIPLEX MAP platform was used. Counts of 11genera were reduced, which did not recover until the last day of the study. The abundance of Bacteroides were not significantly altered in both groups. Christensenella, Rothia, Abiotrophia, Acinetobacter, Anaerotruncus, Holdemania and Turicibacter numbersare significantly increased at day 5 and remained at the same level during the study period. Cephalosporin administration also reduced pro-inflammatory and anti-inflammatory cyto/ chemokines (MIP1α, TNFα, GMCSF, GCSF, sCD40L, FGF2, TGFα, IL1α, IP10).Item Open Access ANAEROBIC FAT FILTERS IN REGENERATIVE MEDICINE(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Храмцова, Н.И.; Плаксин, С.А.; Храмцов, А.А.; Соцков, А.Ю.; Пономарев, Д.Н.Introduction: Adipose tissue is widely used in plastic, aesthetic and regenerative surgery. Autologous fat grafting is one of the most populat procedures in modern surgery. Adipose tissue is usually harvested by lipectomy and consists of two fractions: fat cells, which are used in volumization, and stromal vascular fraction, which is the main source of stem cells. Then it should be specially processed through anaerobic fat transfers to obtain the maximum number of viable adipocytes of stem cells. Methods: The number of non-destroyed adipocytes and fibroblast-like cells was obtained by hematoxylin and eosin dyeing in fat smears in every passage through each anaerobic fat transfer. Results: With each passage through a 1.4 mm fat filter, the number of non-destroyed adipocytes and fibroblast-like cells decreased. When using a 1.2mm filter, 30 passages did not significantly reduce the number of non-destroyed cells. Each passage through a nanofilter with a mesh diameter of 0.5 mm reduced the number of non-destroyed fibroblast-like cells. The number of non-destroyed cells decreased significantly during the transition from filter to filter. When the fat filter was changed, and the cell diameter was reduced, adipocytes were destroyed to a significantly greater extent, and fibroblast-like cells did not suffer. The use of 1-3 passages through a nanofilter kept viable up to 20% fibroblast-like cells, while the use of a nanofilter with a smallest diameter of 0.15 mm allowed fat cells to be completely destroyed already after 3 passages. Conclusion: The choice of fat filter type should be based on the desired result. To obtain the viable adipocytes while maintaining fibroblast-like cells, it is advisable to use a fat filter with a maximum diameter. It is advisable to use a 1.2mm filter to maintain the same number of fibroblast-like cells, but less number of adipocytes. The use of nanofilters is necessary in those cases when it is necessary to disconnect adipocytes as much as possible, or destroy them, preserving only stromal stem cells.Item Open Access МЕСТНОЕ ПРИМЕНЕНИЕ ПОЛИНУКЛЕОТИДА СТАБИЛИЗИРОВАННОГО В ГИДРОГЕЛЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАН В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА(2020) Дмитриева, М.В.; Толеубаев, М.Т.; Кожахметов, С.К.; Игисинов, Н.С.; Николаева, О.Г.Введение: Известно, что полинуклеотиды повышают пролиферацию клеток, стимулируя восстановление тканей. Гидрогель на основе карбоксиметилцеллюлозы выступает как носитель лекарственного вещества, обеспечивая контролируемое высвобождение его из основы в очаг поражения. Цель данного исследования заключается в оценке эффективности Полинуклеотида стабилизированного в гидрогеле для заживления ран у модели крысы, с аллоксановым сахарным диабетом. Методы: Исследованы 40 ран, смоделированные в межлопаточной области крысы с аллоксановым сахарным диабетом, которые были разделены на 3 группы: группа со стандартным лечением (n=14), группа с лечением гидрогелем на основе карбоксиметилцеллюлозы (n=14), группа с лечением Полинуклеотидом стабилизированным в гидрогеле на основе карбоксиметилцеллюлозы (n=12). С целью оценки результатов была проведена планиметрия раны, гистологическое исследование образцов тканей раны. Результаты: Различия в уменьшении и изменении размера раны в группе с лечением Полинуклеотидом стабилизированном в гидрогеле были более значительными, чем в группах с одиночным лечением на 3, 7, 14 и 21день. Анализ числа кровеносных сосудов при гистологическом исследовании показал в группе Полинуклеотид и гидрогель наибольшее увеличение на 7 и 14 дни. Анализ числа кровеносных сосудов при гистологическом исследовании также показал закономерность увеличения во времени. Также в данной группе гистологически была определена более высокая скорость роста фибробластов. Выводы: Этот эксперимент продемонстрировал улучшение заживления ран с использованием Полинуклеотида стабилизированного в гидрогеле по сравнению со стандартным лечением и лечением только гидрогелем, что привело к уменьшению размера раны и сокращению периода заживления.Item Open Access WHOLE TRANSCRIPTOME SEQUENCING ANALYSIS OF PATIENTS WITH ESOPHAGEAL SQUAMOUS CELL CARCINOMA FROM KAZAKHSTAN(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Sharip, A.; Rakhimova, S.; Molkenov, A.; Kozhamkulov, U.; Zhukov, Y.; Omarov, M.; Akilzhanova, A.; Kairov, U.Introduction: Esophageal cancer is the eighth most common cancer worldwide and sixth in Kazakhstan. Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is the predominant histological subtype of esophageal cancer and diagnosed at late stage. The aim of the project was to identify genetic basis of ESCC by analyzing differentially expressed genes (DEGs) from whole-transcriptome sequencing of Kazakhstani patients. Materials and Methods: Tissue samples were obtained from 25 ESCC-affected individuals immediately after Ivor-Lewis esophagectomy from Oncology Center in Nur-Sultan. Whole transcriptome sequencing was performed following the TruSeq RNA Protocol. STAR software and DESeq2package have been used for mapping and defining differentially expressed genes. Functional analysis of DEGs was performed using various R packages. Results: The study sized 14 men and 11women, average age of patient 65.5±7.7 years 88% of the patients were diagnosed with advanced stages T3-T4. Analysis of tumor and normal esophageal tissues identified 7 DEGs, comprising 883 upregulated and 314 downregulated genes (with adjusted p-value <0.05). We found significant 4 up-regulated and 6 down-regulated KEGG pathways (p-value<0.05). Top 300 DEGs were mapped to PPI network and functional enrichment analysis was performed on identified three modules of closely connected nodes (genes). Conclusion: ESCC with moderate dysplasia is the most common histologic subtype of esophageal cancer in our patients and is characterized by a poor prognosis.High-throughput sequencing approach allows identifying molecular pathways involved in esophageal carcinogenesis that could improve diagnosis and treatment strategies. Acknowledgments: Work was supported by grant projects #AP05134722, #AP05135430 and #AP05136106 from the Committee Science and Ministry of Education and Science at the Republic of Kazakhstan.Item Open Access ISOLATION FROM THE KAZAKH TRADITIONAL FOOD PRODUCTS OF A NEW STRAIN OF LACTIC ACID BACTERIA PRODUCING THE HUMAN PLASMINOGEN RECEPTOR(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Shaikhin, S.; Abitayeva, G.; Abilhadirov, A.; Dossova, A.; Pirmanova, A.; Tynybaeva, I.Lactobacillus bacteria are one of the most important groups of the human intestinal microbiota that promote health. Adhesion to host tissues represents a crucial early step in the colonization process of either pathogens or commensal bacteria. Plasminogen - binding may also contribute to bacterial adhesiveness and invasiveness by nonproteolytic mechanisms. Plasminogen (Plg) binds to bacterial cell surface receptors, as well as to receptors on eukaryotic cells and may thus function as a bridge between the bacteria and the epithelium. The project aims to isolate a new strain of lactobacilli producing a protein- receptor for human plasminogen (Plg-R) from traditional Kazakh food products and to study the mechanism of reception. Lactic acid bacteria (LAB) strains isolated from traditional home-made food products and identified using 16S rRNA nucleotide sequence analysis; samples of extracellular proteins obtained from the cell-free supernatant (CFS) of the 24-hour culture after pH adjustment to 8.0 to dissociate acidic cell surface proteins, followed by concentration. Screening for Plg binding in CFS of LAB isolates carried out by Western Blotting assay. The Plg-R was purified from cell lysates after ultrasonic homogenization by Q-sepharose chromatography and the isoelectric point and subunit structure were determined by Mono P column chromatography and Sephadex G-75 gel filtration respectively. Screening of 35 isolates of LAB for Plg binding revealed a strain L. plantarum 30 isolated from homemade butter with maximal Plg-binding activity. The Plg-R band with comparatively high intensity migrated in the region of 47 K on the PAA gel with SDS and showed pI=4.8. The Plg binding was inhibited by adding an analog of lysine ɛ-aminocaproic acid (EACA). The Plg-R eluted in the exclusion volume in gel-filtration, which indicates the quaternary structure. A new strain from the homemade butter which produces the Plg-R was isolated. The inhibition by EACA of the Plg binding with receptor indicates the specificity of the binding which realized via lysine residues on the molecule of Plg-R. The properties of Plg-R are similar to the glycolytic moonlighting enzyme enolase and identification of the Plg-R in progress.Item Open Access WHOLE-GENOME SEQUENCING AND GENOMIC VARIANT ANALYSIS OF KAZAKH INDIVIDUALS(International conference "MODERN PERSPECTIVES FOR BIOMEDICAL SCIENCES: FROM BENCH TO BEDSIDE”; National Laboratory Astana, 2020) Kairov, Ulykbek; Molkenov, Askhat; Rhie, Arang; Rakhimova, Saule; Yoo, Seong-Keun; Kozhamkulov, Ulan; Sharip, Aigul; Akhmetova, Ainur; Abilmazhinova, Aliya; Zhalbinova, Madina; Yerezhepov, Dauren; Zhabagin, Maxat; Shin, Jeongeon; Kharchenko, Peter; Kim, Jong-Il; Lee, Joseph; Seo, Jeong-Sun; Akilzhanova, Ainur; Zhumadilov, ZhaxybayIntroduction: Kazakhstan is the multi-ethnic country with the dominant Kazakh ethnic group in the middle of the Eurasian continent. All existing human genetic diversity datasets are only partial representations of worldwide human diversity. The information about genetic diversity of Kazakh population is lacking in these datasets. Our study aims to perform whole-genome sequencing of five healthy Kazakhs to provide insights into genetic structure and diversity of Kazakh populations in Kazakhstan. Materials and Methods: Genomic DNA of five healthy Kazakhs was isolated from peripheral blood and sequenced with Illumina HiSeq2000 to target 30-fold coverage. Reads were aligned and assembly to the human reference genome (NCBI GRCh37, hg19) and reference mitochondrial DNA rCRS (NC_012920) using Burrows-Wheeler Aligner. GATK and haplotype caller procedure has been used for genomic variants calling. All the found genomic variants were then further annotated by SIFT, PolyPhen2, SNPedia and ClinVar using ANNOVAR. Results: We sequenced and analysed the whole-genomes of ethnic Kazakh individuals with the coverage (28X-32X). From 98.85 to 99.58 % base pairs were totally mapped with properly mapped 99.06 % in average. Het/Hom and Ti/Tv ratios for each whole genome ranged from 1.35 to 1.49 and from 2.07 to 2.08, respectively. We have identified the novel variants that previously not catalogued in 1000 Genomes Project, ExAC or NCBI Reference Assembly dbSNP (snp138, avsnp138, avsnp150, hg19). Conclusion: We showed high genetic admixture of Kazakh genomes on autosomal level and similar complex heterogeneity of Central Asian populations. This whole-genome sequences information of healthy Kazakh individuals may be an important reference for biomedical studies investigating disease associations and population-wide genomic studies of ethnically diverse Central Asian region. Acknowledgments: Work was supported by grant projects #AP05134722, #AP05135430 and #AP05136106 from the Committee Science and Ministry of Education and Science at the Republic of Kazakhstan.
- «
- 1 (current)
- 2
- 3
- »