Abstract:
Введение: Аутологичные клетки костного мозга больных с хронической аутоиммунной патологией
характеризуются снижением биорегуляторной активности и мало пригодны для клеточной терапии.
Важным способом повышения функциональной активности трансплантируемого клеточного
материала является культивирование. В цель работы входило оценить на ультраструктурном
уровне морфо-функциональное состояние клеток мононуклеарной фракции костного мозга
больных с тяжелой аутоиммунной патологией до и после культивирования.
Материал и методы: После клинико-лабораторного обследования 33 больных с системной
склеродермией и первичным билиарным циррозом печени была проведена аспирация
костного мозга из гребня подвздошной кости в количестве 400 мл. Клетки мононуклеарной
фракции костного мозга культивировали в течение 72часов. Для электронномикроскопического
исследования клетки фиксировали в 2,5% растворе глютаральдегида с постфиксацией в 1%
растворе четырехокиси осмия, проводились по общепринятой методике и заключались в эпон.
Ультратонкие срезы готовили на ультрамикротоме LeicaУльтратонкие срезы контрастировали
уранилацетатом и цитратом свинца по Рейнольдсу, исследовали и сохраняли в электронном
микроскопе Libra (C. Zeiss).
Результаты: Морфо-функциональное состояние клеток различных классов кроветворения
до культивирования характеризовалось ультраструктурными признаками энергетической
дисфункции митохондрий и недостаточности микровезикулярной секреторной функции. После
прекультивирования отмечено появление малых лимфоцитов и бластных форм. Содержание
клеток предшественников (прогениторов) было высоким СД 34+ (25.85%), СД 45+34+ (78,24%,
71,60%). Ультраструктура митохондрий отражала усиление процессов окислительного
фосфорилирования, обеспечивающих высокую биосинтетическую активность данных клеток.
Увеличивалось количество и улучшалось качество секреторных везикул - эндосом с экзосомами,
участвующих в регуляции иммунного ответа. Помимо апоптозных тел, имеющих важное значение
в межклеточной коммуникации стволовых клеток, нами были отмечены лимфоциты в состоянии
преапоптоза с резкой конденсацией ядерного хроматина,что возможно, имеет отношение к
передаче генетической информации.
Выводы: Культивирование мононуклеарной фракции костного мозга больных с аутоиммунной
патологией характеризуется появлением малых лимфоцитов и бластных форм, наличием
лимфоцитов с устраненной митохондриальной недостаточностью,увеличением количества
секреторных везикул и структур межклеточной коммуникации.